Megazyme試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌，用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色，顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素呈正相關(guān)，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，計(jì)算樣品濃度。

　　該檢測(cè)試劑盒的主要在于直接提供高純度的酶，酶的活力是標(biāo)準(zhǔn)化的，而標(biāo)準(zhǔn)化的酶的活力在測(cè)量抗性淀粉是*的。該試劑盒提供的酶都是穩(wěn)定的液體，可以保存到試劑盒有效期，并且是直接應(yīng)用液，不需要使用前再溶解。

　　一、樣品收集、處理及保存方法

　　1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

　　2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。

　　3.細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

　　5.保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

　　二、操作注意事項(xiàng)

　　1.Megazyme試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

　　2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

　　3.按照說(shuō)明書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍，結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。

　　4.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

　　5.所有液體組分使用前充分搖勻。